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SNHG8基因敲除抑制结直肠癌细胞的生长、迁移和侵袭
发表期刊：BiomedicinePharmacotherapy
影响因子：3.
发表日期：.05.30
1、研究背景结直肠癌：最常见的恶性肿瘤之一，在结直肠癌的主要治疗方法包括手术、化疗和放疗。近十年来，随着综合治疗方法的发展，结直肠癌患者的预后有了显著改善。然而，晚期结直肠癌的预后仍然很差。因此，阐明结直肠癌的发病机制和寻找新的潜在靶分子对改善长期预后具有重要意义。小核仁RNA宿主基因8（SNHG8）：小核仁RNA宿主基因（SNHGs）家族的重要成员。SNHG产生一种稳定的细胞质lncRNAsSNHG8，在癌细胞中异常表达。SNHG8在许多生物过程中起着至关重要的作用，包括转录、翻译和RNA剪接。SNHG8全长nt，它在多种癌症中的表达及生物学功能已被探讨，包括子宫内膜癌、非小细胞肺癌和肝细胞癌，而其是否在大肠癌中异常表达，是否在大肠癌的发生发展中发挥作用，目前尚不清楚。2、研究内容本研究首先探讨了SNHG8在结直肠癌中的表达模式和生物学功能。应用实时PCR技术检测SNHG8在大肠癌组织和大肠癌细胞系中的表达水平。然后用CCK8法检测SNHG8对大肠癌细胞增殖的影响，用transwell法检测SNHG8的迁移和侵袭情况。生物信息学用于预测与SNHG8相互作用的海绵状miRNA。采用双荧光素酶报告法验证SNHG8与miRNA的相互作用。数据显示SNHG8在结直肠癌组织和细胞系中显著上调。此外，SNHG8基因敲除可显著抑制大肠癌细胞的生长、迁移和侵袭。预测miR-可能与SNHG8相互作用，并用双荧光素酶报告法证实了miR-可能与SNHG8相互作用。此外，rescue实验显示SNHG8通过调节miR-发挥促肿瘤作用。3、研究思路4、研究结果结直肠癌中SNHG8表达上调可预测预后不良图1A-B：检测40对结直肠癌组织及癌旁正常组织中SNHG8的表达。我们的数据显示与癌旁正常组织相比，SNHG8在癌组织中显著上调。图1C：比较转移患者和非转移患者之间SNHG8的表达。结果表明，SNHG8在有转移的患者中的表达显著高于无转移的患者。图1D：癌症基因组图谱计划（TGCA）数据库的汇总数据显示，与正常组织相比，SNHG8在肿瘤组织中的表达显著。图1E：对入选患者的生存分析表明，与SNHG8高表达患者相比，低SNHG8表达的患者预后更好。图1F：对细胞系中SNHG8表达的观察表明，与正常结肠上皮细胞相比，结直肠癌细胞系表现出更高的SNHG8表达。图1LncRNA-SNHG8在结直肠癌中表达上调并预测预后不良SNHG8基因敲除抑制大肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭图2A-B：选择，将SNHG8shRNA转染大肠癌细胞SW和HCT，进行内源性SNHG8高表达的敲除实验并测定其敲除效应。图2C-D：CKK8实验表明，敲除SNHG8可显著抑制SW和HCT细胞的增殖。图2E-F：sh-SNHG8显著抑制SW和HCT细胞的平板克隆形成能力。图2G-J：transwell实验评价SNHG8在细胞迁移和侵袭中的作用。数据显示，与对照组相比，sh-SNHG8基因敲除组的细胞显示出较弱的迁移和侵袭能力。综上所述，这些发现表明SNHG8基因的敲除显著抑制了结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭。图2敲除lncRNA-SNHG8抑制大肠癌细胞增殖和侵袭SNHG8可直接与miR-海绵结合图3A：使用RNAhybrid软件预测了可能的下游分子。我们的数据显示SNHG8和miR-之间有一个结合位点。图3B：在临床样本中探讨了SNHG8与miR-的相关性。研究发现miR-的表达与结直肠癌组织中SNHG8呈负相关。图3C-D：评估转染sh-SNHG8的细胞中miR-表达的变化。实时定量逆转录聚合酶链反应显示，与对照细胞相比，经sh-SNHG8处理的SW和HCT细胞显示出更高的miR-表达。图3E-F：双荧光素酶报告分析miR-模拟物对野生型SNHG8细胞的荧光素酶报告活性有抑制作用。然而，在转染突变型SNHG8载体的细胞中未观察到这些效应。综上所述，这些结果表明SNHG8可以直接与miR-发生海绵状反应。图3SNHG8直接用miR-海绵SNHG8通过miR-发挥促肿瘤作用进一步探讨SNHG8是否通过miR-发挥促肿瘤作用图4A：将SW细胞与sh-SNHG8或sh-NC以及in-miR-或in-miRNC共转染。检测这些细胞中的SNHG8表达证实，sh-SNHG8可抑制SNHG8，但经miR-处理可逆转。图4B-C：CCK8和平板克隆形成形成实验表明，抑制miR-可以挽救sh-SNHG8对大肠癌细胞增殖的抑制作用。图4D-E:transwell分析表明miR-可以减弱SNHG8对结直肠癌细胞迁移和侵袭的影响。这些结果表明，在结直肠癌细胞中，SNHG8通过miR-发挥促肿瘤作用。图4SNHG8通过miR-发挥促肿瘤作用5、结论与讨论结论：首次揭示SNHG8在结直肠癌中的生物学作用和作用机制的研究。lncRNA-SNHG8在结直肠癌组织和细胞系中显著上调。SNHG8基因敲除可显著抑制结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭。我们的发现可能有助于进一步揭示结直肠癌的发病机制，并为将来提供潜在的治疗分子。局限性：首先，我们只研究了SNHG8在大肠癌中的生物学功能。其次，SNHG8/miR-可能与之相互作用或调节的下游通路在很大程度上是未知的。在本研究中，并未进一步探讨已知有助于结肠肿瘤发生的途径，例如K-RAS/Wnt途径。因此，SNHG8/miR-是否对这些途径有影响尚需进一步探讨。今后的研究应进一步验证SNHG8在体内的生物学功能以及SNHG8/miR-可能介导的下游途径。咸菜小编太过懒了，迟迟不更新，不能继续堕落咸菜了。该打！每周把一周看的文献还有新学习的知识点分享给大家~预览时标签不可点收录于话题#个上一篇下一篇