Vero（又称非洲绿猴肾细胞）是一种具有干扰素分泌缺陷的细胞，容易受到各种动物病毒感染。其被广泛应用于病毒感染分子机制研究、疫苗及重组蛋白的生产中，并被世界卫生组织认可作为疫苗生产最常用的细胞系之一。
例如：Vero细胞在流感疫苗、狂犬疫苗、乙型脑炎疫苗、出血热疫苗、脊髓灰质炎疫苗、登革热疫苗、寨卡病毒疫苗等研发和生产中发挥着重要作用。
对于疫苗生产来说，如何优化工艺，最大程度的提高产能，降低生产成本，一直是永恒的话题。除了优化下游的步骤，是否有可能从上游细胞入手，通过改变关键基因获得产病毒能力更高的Vero细胞株呢？
STAT1蛋白是细胞干扰素抗病毒应答的重要分子。ATCC通过CRISPR/Cas9基因编辑技术成功敲除Vero细胞的STAT1基因，开发了一个新的细胞模型Vero.STAT1KO(ATCC?CCL-81-VHG)。
实验证明：基因敲除后的Vero细胞没有STAT1蛋白表达，与亲本细胞系相比，病毒产生能力明显增加。接种GFP-SeV和DengueII后，胞内病毒基因组复制量提高30倍，病毒滴度提高10倍。
图1.DengueII病毒感染VeroWT和Vero.STAT1KO细胞，7天后通过抗登革热抗体检测病毒，发现Vero.STAT1KO细胞内的病毒含量是野生型的3倍。
图2.感染DengueII病毒后检测细胞上清的TCID50值。与亲本相比，Vero.STAT1KO的病毒产量提高10倍。
图3.RT-PCR法定量检测感染DengueII病毒基因组拷贝数。与亲本相比，Vero.STAT1KO的病毒基因组拷贝数提高30倍。
图4.Vero.STAT1KO细胞对干扰素无响应。
图5.Vero.STAT1KO细胞无Cas9/CMV基因序列的整合。
图6.Vero.STAT1KO细胞与亲本细胞形态相似，生长速度稍慢一些。
●小结●改良后的Vero细胞大大提高了病毒生产滴度，稳定敲除STAT1基因，对外源性干扰素刺激无响应，无Cas9/CMV基因序列的整合。以上特征使得该细胞成为基础研究，病毒疫苗生产一个优质的细胞模型。
ATCC相关产品：Vero（CCL-81）：原始株。
cGMPVero（CCL-81.4）：该细胞株在cGMP标准下生产和分发。
Vero76（CRL-）：该细胞株比原始株有更低的饱和密度。
VeroC（CRL-）：单层生长，适合培养复制慢病毒。
VeroSTAT1KO（CCL-81-VHG）：经CRISPR/Cas9改造后，提高了生产病毒的滴度。
Vero-SF-ACF（CCL-81.5）：经无血清和无动物成分培养基驯化而成。
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