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随着大麦高质量基因组参考序列的完成,利用基因编辑技术改良大麦性状将变得更加有的放矢。因此,研究CRISPR/Cas9基因编辑技术在大麦上的编辑效率和特点将显得更加急迫。
最近,科研人员在大麦中利用CRISPR/Cas9工具修饰了β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(endo-N-acetyl-β-D-glucosaminidase,ENGase)基因,编辑载体通过基因枪和农杆菌两种方法导入大麦基因组中。深入分析表明,Cas9可以成功实现大麦靶标位点的Indels和大片段缺失,突变率可以高达到78%。
大麦CRISPR/Cas9基因编辑技术的持续完善以及大麦功能基因组研究的不断深入将把大麦育种带入新的发展阶段。
Front.PlantSci.,25April
HeritableGenomicFragmentDeletionsandSmallIndelsinthePutativeENGaseGeneInducedbyCRISPR/Cas9inBarley
Author
EszterKapusi,MariaCorcuera-Gómez,StanislavMelnikandEvaStoger*
*:DepartmentofAppliedGeneticsandCellBiology,UniversityofNaturalResourcesandLifeSciences,Austria
Abstract
TargetedgenomeeditingwiththeCRISPR/Cas9systemhasbeenusedextensivelyfortheselectivemutationofplantgenes.HereweusedCRISPR/Cas9todisrupttheputativebarley(Hordeumvulgarecv.“GoldenPromise”)endo-N-acetyl-β-D-glucosaminidase(ENGase)gene.FivesingleguideRNAs(sgRNAs)weredesignedfordifferenttargetsitesintheupstreampartoftheENGasecodingregion.Targetedfragmentdeletionswereinducedbyco-bombardingselected