研一考试目的基因获取及功能研究方法

一、简答题

1.试比较qPCR中SYBRGreen法和TaqMan探针法优缺点。

SYBRGreen法:

TaqMan探针法:

2.酵母双杂交技术的应用

答:酵母双杂交技术作为发现和研究在活细胞体内的蛋白质与蛋白质之间的相互作用的技术平台,在近几年来得到了广泛运用。酵母双杂交系统是在真核模式生物酵母中进行的,研究活细胞内蛋白质相互作用,对蛋白质之间微弱的、瞬间的作用也能够通过报告基因的表达产物敏感地检测得到,它是一种具有很高灵敏度的研究蛋白质之间关系的技术。

3.题目上举了个例子,要求写出RNAi研究的一般技术路线。

4.CHIP和DNApull-down都能用于研究DNA和蛋白质的关系,二者的应用目的上有何不同?

DNApull-down主要用于筛选、鉴定与目的DNA或RNA片段相互作用的蛋白质(转录因子、翻译调控因子类或RNA结合蛋白等).

CHIP用于转录因子结合位点或组蛋白特异性修饰位点的研究.

5.CRISPR和TALEN的优缺点比较

6.激光扫描共聚焦显微镜和传统显微镜有什么不同?

CLSM最大的特点是用激光作激发光源,逐点、逐行、逐面扫描成像,能够使扫描限制在样品的一个平面内。

1.抑制图像的模糊,获得清晰的图像

2.具有更高的轴向分辨率,并可获取连续光学切片

3.增加侧向分辨率

4.由于点对点扫描去除了杂散光的影响。

二、问答题

1.通过实验获取了一个蛋白,通过公司购买了一个完整的cDNARACE文库,问怎么获得全长基因?

2.想在肾脏组织特异性表达某个基因,问怎么插入该基因?(题目有点长,记不太清了)

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