济南白癜风医院 http://baidianfeng.39.net/a_zzzl/131229/4319047.html主持人:当前科研领域最火的技术可谓是刚摘得诺贝尔化学奖的CRISPR/Cas9了,科学家们寄希望于此技术以解决人类无数种难以攻克的疾病。因为简单、廉价和高效,“分子魔剪”CRISPR/Cas9已经成为全球最为流行的基因编辑技术,获得诺奖实至名归。今晚本节目将给大家独家揭秘CRISPR/Cas9技术背后的故事。另外,我们还会有请掌握CRISPR/Cas9技术的资深科学家现身说法!接下来,就让我们先来访问一下科学家实验室冰箱里的那一管质粒……CRISPR/Cas9:没错,我就是这管质粒,我是CRISPR/Cas9。人称基因编辑小能手,简单是我的小名,高效是我的外号。人见人爱,花见花开,用我发文乐开怀。我的家乡是细菌与古细菌国,在那里我是国家的护卫,专职应对病毒和质粒的入侵。我有很多病毒和质粒的档案,每当这些坏核酸入侵国家,我就拿着通缉令(crRNA/tracrRNA)去扫描,被我识别到我就将其消灭掉!现在科学家把我改造了放到质粒载体里,然后给我配发一个优化的通缉令,这个通缉令把原有的crRNA/tracrRNA组合在一起变成了sgRNA,识别效果还是杠杠滴。别看我名字这么时髦,其实我是一个刀客,Cas9核酸酶就是我的刀,我每天拿着刀和通缉令去巡逻。SgRNA通缉令上有20个碱基的引导序列用来描述坏核酸的特征。我每次都使用Cas9核酸酶扫描所遇到的核酸序列,我通常先寻找PAM序列(NGG和NAG),如果PAM前方的20个碱基序列恰好和通缉令上的引导序列一致,嘿嘿,就别怪我刀下无情、一刀两段了!我也凭借着这份鬼斧神工的技能,走上了科研神坛,享有“分子魔剪”的美誉。主持人:这样说来,你就是在基因组上砍了一刀,这似乎跟基因编辑没有关系吧?科学家接过话筒:这个就由我来说吧,CRISPR/Cas9本身并没有直接改变基因组DNA序列,他只是在基因组DNA上砍了一刀就扬长而去,造成一个双链缺口(DoubleStrandBreaks)。然而基因是个完美主义者,又怎能容忍缺口这种不完美的事情,所以会想方设法把它补好。通常会用NHEJ(Non-homologousendjoining)的方式进行随机修补,如果造成了非3倍数的碱基改变,产生了“移码突变”,就能实现基因敲除。如果在CRISPR/Cas9造成双链缺口的同时,把包含同源DNA片段的特定序列的修复模板(Donor)图纸一起给细胞,细胞也可能会把缺口修复跟图纸得一模一样,这种修复模式称为HDR(Homologydirectedrepair),这样子就可以实现基因敲入或者点突变了!主持人:看来科学家对做基因编辑很有心得呀!请问您基因编辑做的这么好,是有什么秘诀吗?科学家:秘诀就是专注。我在赛业生物工作十余年了,一直专注于动物和细胞的基因编辑。虽然基因编辑是一项原理听起来很简单的技术,但真正做起来并没有那么容易。我所做的就是日复一日的持续不断的优化方案,优化实验体系,以获得更高的效率,更快的编辑速度,更好的服务客户。主持人:说到赛业生物,不得不提到他们专业的CRISPR/Cas9基因编辑平台。赛业生物在基因编辑领域深耕14年,已有上万例基因敲除项目经验积累,基因敲除平台成熟稳定。赛业提供的“基因敲除载体——敲除细胞模型——敲除动物模型”一站式服务已服务全球数万名科学家,帮助客户发表了包括CNS在内的余篇高质量研究论文。从基因编辑方案的设计到服务质量的管理,赛业都一贯注重专业化、高效化。专业的技术团队为客户提供最切合研究需求的模型构建方案,高效的项目管理团队负责客户项目汇报与管理,以确保实验进度按要求推进。数十年来,赛业服务赢得客户高度评价。同时,赛业希望以下这些最具性价比的服务可帮您节约课题经费,加速研究进展,冲刺高质量研究论文。
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