徐萌（清华大学）、王皞鹏（上海科技大学）撰文
宝叔责编
兮效应T细胞是对抗感染和肿瘤的核心细胞亚型。因此，如何在慢性感染或者肿瘤发生中增强效应T细胞响应，是T细胞相关免疫疗法的关键所在。免疫检查点抑制剂，诸如PD-阻断剂等，可以有效的将慢性感染或者肿瘤微环境中的耗竭性T细胞重新激活，使之具有部分效应T细胞特征。然而，由于慢性感染或者肿瘤环境会筛选性的促进效应T细胞死亡，介导耗竭性T细胞分化，同时若慢性炎症环境未清除，免疫检查点抑制剂引起的效应T细胞再激活并不具有持久性，因此如何在慢性感染或者肿瘤进展过程中，增强稳定的效应T细胞响应，成为T细胞相关疗法中的一个主要问题。近期的研究发现多个转录因子，包括c-Jun,Runx3等，可以帮助T细胞在肿瘤微环境中更好的发挥效应功能。另一方面，敲除特定转录因子，诸如TOX和NR4A,会介导短期内较强的效应T细胞响应。然而，在转录层面上，领域内仍旧缺失一个如PD-的，具有高强度抑制效应T细胞扩增或者分化的“刹车机制”。年2月25日，宾夕法尼亚大学的E.JohnWherry和史俊炜团队（第一作者为陈则宇博士）于Cell上发表了题为“InvivoCD8+TcellCRISPRscreeningrevealscontrolbyFliininfectionandcancer”的文章，采用优化的T细胞CRISPR体内筛选体系，鉴定出了转录因子Fli对于效应T细胞扩增和分化的强烈抑制作用。在不同的体系中，敲除Fli的抗原特异性CD8T细胞会获得5-30倍的数量扩增，并且获得更强杀伤性淋巴细胞特征。研究人员首先建立并且优化了针对抗原特异性T细胞的体内CRISPR筛选体系（命名为“OpTICS”），包括更改了逆转录病毒载体的sgRNA序列，使用单Cas9拷贝的载体细胞进而降低DNA损伤对效应T细胞的影响，优化了转染和细胞分选方案等。之后，研究人员结合已有的抗原特异性T细胞在不同阶段的RNA-Seq和ATAC-Seq数据，根据基因表达量筛选出来了20个转录因子，建立了转录因子sgRNA文库。利用OpTICS系统，研究人员鉴定出了在急性和慢性感染模型中，具有阳性筛选特性的多个转录因子，包括Fli,Smad2,Erg,Nfatc2,Irf2等等。之后研究人员重点
