法医专场法医DNA分型过程中异常峰的

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DNA鉴定技术为刑事侦查提供了准确的线索,在一定程度上加快了警方破案的速度,成为了打击不法分子的有力武器。

而在法医分析和打击犯罪中,DNA分析被认为是目前最重要,最有效的工具。

在日常DNA数据分析过程中,不可避免的会遇到一些常见异常峰判定,小编根据以往经验汇总了如下情况,希望对各位有所帮助。

1.等位基因丢失和无效等位基因

(1)分型表现

VWA位点不同试剂盒验证结果不同

A.引物结合区核苷酸变化导致等位基因扩增失败;B.等位基因丢失导致杂合子变成伪纯合子;C.两套不同的引物组合扩增相同的样本可能会出现不同的结果;D.此现象常常会影响到DNA数据库中数据的比对;E.使用新试剂盒前需要进行大量的一致性验证;

(2)杂合子个体在引物结合区具有序列多态性的影响的示意图

(3)等位基因丢失的验证方法

A.适当降低退火温度重新扩增;

B.换用其他试剂盒重新检测;

C.设计引物重新扩增和检测;

D.等位基因亚克隆和测序;

E.记录在案以备查询。

2.拔起峰(Pullup)

(1)产生机制

Matrix文件通过包含每种颜色的样本的电泳而建立,各种颜色的电泳结果组合成一种数字矩阵,以消除与其他颜色光谱重叠的部分,每一种荧光染料都有不同波长的最大发射光谱,而当某一荧光染料过多造成Matrix去颜色叠加不能正常工作,会发生“拔起”(Pullup)的现象。拔起是由于颜色从一个光谱通道扩散到另一个的结果,通常由于超峰高的原因。

(2)表现状态

(3)原因及解决方法

3.前高后低现象

(1)图谱表现

拥有自主发明专利的内部质控(QTS和QTL),可用于样本质量的快速评估,判断样本是否降解或抑制。(如图1降解检材图谱和图2抑制程度由低?高图谱)

图1降解样本图谱

图2抑制程度由低?高图谱

增加内部质控的分型鉴定试剂盒※,可用于样本质量的快速评估,判断样本是否降解或抑制。NHID?25A案件试剂盒的内部质控(QTS和QTL)可以轻松判断模板质量(如图1降解检材图谱和图2抑制程度由低?高图谱)

(2)产生原因和解决方法




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