主办单位:南京工业大学
协办单位:中国生物工程学会
协办单位:中国化工学会生物化工专业委员会
ISSN:-CN:32-/Q
酿酒酵母NST1基因敲除菌的构建及其对抗氧化的影响
朱红,王梦飞,焦宏亮,王金鹏,周华,蔡恒
南京工业大学生物与制药工程学院
摘要:自由基的生成在老龄化相关的疾病中起着核心作用。自由基作为生物体的基本保护机制,能够参与各种代谢信号途径的调节,传递生命活动所需的能量,也可作为吞噬细胞消灭细菌或病原体的主要介质。此外,自由基还影响基因的转录和表达,参与重要生命活动的调节,但自由基尤其是活性氧的过量生成则会造成机体内氧化/还原的失衡,促进氧化应激的发生,诱发疾病。在本文,笔者构建一株酿酒酵母NST1基因缺失菌株并研究其对抗氧能力的影响。以酿酒酵母BY中的NST1基因为研究对象,利用Cre-LoxP基因敲除系统将NST1基因与G抗性基因(kanr)相替换,实现目的基因的敲除。通过稀释点样实验、荧光电子显微镜检测和荧光定量PCR等技术分析NST1基因在酿酒酵母抗氧化体系中的作用。经过G抗性筛选和基因组PCR鉴定,成功获得了NST1基因缺失菌株nst1Δ,实验数据显示nst1Δ重组菌胞内ROS增多,并且降低了细胞壁完整性信号通路(CWI)途径下游基因RLM1的表达水平,表明NST1基因的敲除对酿酒酵母BY的抗氧化性能有影响。
点击文末左下角“阅读原文”查看全文
作者简介/Profile/
第一作者:朱红
朱红,江苏泰州人,年6月毕业于南京工业大学浦江学院获得学士学位,年进入南京工业大学周华/蔡恒课题组攻读硕士学位,主要进行分子生物,酵母抗性机理相关研究。在读期间已发表学术论文1篇。
通讯作者:蔡恒
蔡恒,博士,副教授,硕士生导师,长期从事基因工程,代谢工程,发酵过程优化等工作。开展的研究工作主要包括:⑴基于基因组学、蛋白质组学分析的抗逆元器件机理研究;⑵利用合成生物学的基本原理及方法对人工细胞的性能进行改造与系统优化;⑶通过对微生物代谢和转运网络的分析和遗传操作,实现高抗逆性全糖同步利用和定向转化,选育能直接利用纤维素水解液中全部糖类来发酵生产液体燃料、大宗化学品和生物材料(以乙醇、琥珀酸、乳酸、丁醇、PHA等)的抗逆代谢工程菌株,为生物炼制技术产业化奠定基础;⑷化学品的生物合成元件及模块的分子基础研究;⑸酶的定向进化及逆代谢工程,发酵过程调控及优化等。近年来主持了1项国家“”子课题和2项省级自然科学基金;同时参与1项国家“”子课题及1项国家自然科学基金项目等科研课题研究。近5年以第一或通讯作者在本学科高水平期刊上发表SCI收录论文10余篇,申请国家专利10多项,授权5项,合作编写专著2部。
DOI:10./j.issn.-..05.引用本文:[1]朱红,王梦飞,焦宏亮,等.酿酒酵母NST1基因敲除菌的构建及其对抗氧化的影响[J].生物加工过程,,18(05):-.投稿、转载授权事宜请联系
-
邮箱:shengwu
njtech.edu.cn图文
朱红、蔡恒排版|张迪
扫码