我们在研究新基因功能或者筛选药物在某种疾病中的作用研究时，经常要检测它们对细胞的生长。今天，医学方小编就给大家总结一下有关细胞生长状况的功能学实验。
细胞生长曲线细胞生长曲线是最基本的指标，用来测定细胞增长基本规律常用的简便方法。标准的细胞生长曲线近似“S”形，一般在传代后第一天细胞数有所减少，经过一段时间的潜伏期，再进入对数生长期，达到平台期和生长稳定，最后衰老。
1台盼蓝染色法细胞计数这是细胞培养中常用的基本技术之一。所用材料为血球计数板，和显微镜。
细胞计数的基本步骤：(1)取清洁计数板和专用盖玻片，用无尘布轻轻拭干.(2)取细胞悬液0.3mL，加入0.9mL结晶紫(或台盼蓝)染液，混匀后，滴半滴于血球计数板内，以充满不外溢为宜。也可直接将细胞悬液在一侧滴加到盖玻片中，不要溢出，也不要过少或出现气泡.(3)在显微镜下用10×物镜观察计数四角大分格中的细胞数。代入下式得出细胞密度。
细胞数/ml=(4大格细胞数之和/4大格细胞)××稀释倍数
台盼蓝染色法可计算出活细胞数和死细胞数以测定细胞存活百分率。一般0.5%～1%的台盼蓝染液可使死细胞染成蓝色，活细胞不着色。细胞计数除用上述方法外，目前还有新型的自动计数仪，可供大规模细胞计数工作使用。各种型号的计数操作不尽相同，可根据使用说明进行操作。
注意事项：
在进行细胞计数操作时，必须把细胞悬液准备好，细胞应分散良好，并充分混匀。
2氧化还原法检测细胞生长增殖图片来自网络
常用的方法有MTT，WST-8，CCK-8等。该方法已被广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞增殖试验、细胞毒性试验以及药敏试验等。
MTT基本原理是利用活细胞的线粒体脱氢酶在代谢过程中将黄色的可溶性四唑盐还原为不溶于水的甲臢,其与活细胞数量和细胞活化状态呈正比线性关系。溶解沉积在细胞中的甲臢晶体，通过酶标仪测量细胞液的吸光度值(Opticaldensity即OD值)便可检测出待测细胞样活性，细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。对于同样的细胞，颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。WST-8是一种类似于MTT的化合物，是MTT的一种升级替代产品。在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的甲臢。
WST-8和MTT相比有明显的优点。首先，MTT被线粒体内的一些脱氢酶还原生成的甲臢不溶，需要有特定的溶解液来溶解；而WST-8产生的是水溶性的，可以省去后续的溶解步骤。其次，WST-8比XTT和MTS更稳定，使实验结果更加稳定。另外，WST-8和MTT等相比，线性范围更宽，灵敏度更高。
CCK-8的原理跟MTT，WST-8其实也是相同的，是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。CCK-8法生成的甲臢是水溶性的，不需要再吸出培养液加入有机溶剂溶解这个步骤，因此可以减少一定误差。其他优点就是重复性优于MTT；对细胞毒性小；为1瓶溶液，毋需预制，即开即用，但是价格比较昂贵。
具体方法是：
在同一规格的96孔/24孔细胞培养板中，每组最少3孔，接种等量的同代细胞，经相同基因编辑或者药物处理后，培养每隔时间段取出细胞测试，以培养时间为横座标，不同时刻的细胞数的对数为纵座标，标出各点并连成线，即为该细胞的生长曲线，可反应出细胞生长的动态。
“医学方”始终致力于服务“医学人”，将最前沿、最有价值的临床、科研原创文章推送给各位临床医师、科研人员。
医学方已推出“实验室那些事儿”“SCI写作技巧”“文献精读与解析”“医学英语轻松学”“国自然基金申请”“临床数据挖掘”、“基因数据挖掘”、“R语言教程”、“医学统计学”、“微创动物实验培训”等多个专题课程，如需了解课程详细推文，可北京现在治疗白癜风得多少钱中科荣获公益中国爱心救助定点医院
