TurboKnockout基因编辑人源化

CRISPR/Cas9技术是当前构建基因编辑小鼠的常用技术,但通常情况下,大片段的基因敲入或者人源化小鼠利用CRISPR/Cas9技术构建难度较高。此外CRISPR/Cas9技术可能出现的脱靶效应以及专利纠纷问题会对药企带来风险。

针对上述问题,赛业生物为您推荐TurboKnockout,TurboKnockout基因编辑技术建立在传统ES打靶技术之上,基因修饰准确,效果稳定,无脱靶效应,可通过BAC重组实现高达kb的大片段基因敲入,且通过在ES水平实现多步BAC重组,可大大缩短项目周期,且与CRISPR/Cas9技术相比,TurboKnockout技术无专利纠纷困扰,是涉及新药研发项目常用的技术。

细菌人工染色体(BAC)是低拷贝载体,可容纳kb以上的外源DNA,通过BAC同源重组或定点特异性重组的方式,达到实现用人基因组片段替代相应小鼠基因组片段的目的,是构建人源化小鼠模型的经典策略。

服务流程

Step1打靶载体设计和构建

Step2电转ES筛选阳性细胞

Step3首建鼠制备

Step4F1繁殖与筛选

服务流程

BAC重组可实现kb大片段基因编辑

由于受DNA克隆载体容量的限制,制作基因修饰动物的外源基因片段通常小于30kb,因此某些调控基因活性的重要元素不可避免地被丢失。BAC可容纳kb以上的外源DNA,通过BAC重组可引入更大的基因及调控序列,从而更接近于内源基因的表达模式。

TurboKnockout无脱靶效应

TurboKnockout基因敲除技术建立在传统ES打靶技术之上,基因修饰准确,效果稳定,无脱靶效应,可胜任难度较高的小鼠基因编辑。

无技术专利纠纷

与CRISPR/Cas9技术相比,TurboKnockout技术无专利纠纷困扰,是涉及新药研发项目常用的技术。

周期更短

TurboKnockout基因编辑技术建立在传统ES打靶技术之上,跨越“嵌合体”阶段并自删除Neo以减少两代繁育时间,ES打靶快至6个月。同时,TurboKnockout可在ES水平做多步BAC重组,更能缩短实验周期。

本文来源:赛业生物

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